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黄曲霉毒素

黄曲霉毒素（AFT）是黄曲霉和寄生曲霉等某些菌株产生的双呋喃环类毒素，属于真菌毒素。其衍生物有约20种，分别命名为B1、B2、G1、G2、M1、M2、GM、P1、Q1、毒醇等。其中以B1的毒性最大，致癌性最强。年，黄曲霉毒素被世界卫生组织（WHO）癌症研究机构划定为一类天然存在的致癌物，是毒性极强的剧毒物质。黄曲霉毒素主要污染粮油及其制品，各种植物性与动物性食品也能被污染。

世界各地都对食品和动物饲料中的霉菌毒素水平进行了规定，因此人们对快速，灵敏和选择性的分析方法产生了极大的兴趣。但是困难在于，存在大量粘性油基质的情况下确定痕量水平(PPb水平）的霉菌毒素浓度是一项艰巨的任务。分析结果的准确性和精确度取决于用于从复杂食品基质中分离霉菌毒素的提取和净化方法，还取决于准确转移粘性液体的量。哲斯泰自动化解决方案哲斯泰有好方法：使用自动化液液萃取从食用油样品中提取霉菌毒素，然后使用LC-MS/MS来检测。以下示意图就是我们的整体解决方案。应用文献可以点击原文阅读来获取。

哲斯泰自动化提取食用油中霉菌毒素的样品前处理平台。关键模块：快速振荡机、多位真空蒸发站、天平、离心机、孵育搅拌器、2米双头样品前处理平台。

分析设备：配备AgilentPoroshellEC-C18色谱柱（3.0x50mm，2.7μm）的AgilentHPLC与配有喷射流电喷雾源的AgilentUltivo三重四极杆质谱仪联用。

HPLC是近几年发展起来的检测黄曲霉毒素的方法，主要是用荧光检测器检测。黄曲霉毒素经柱后电化学衍生化后，能发射特征性荧光，被荧光检测器捕获后而得到检测。

自动化流程：

将食用油样品放入10mL小瓶中，然后将小瓶放在MPS上（唯一手动步骤）

将小瓶移至60°C的培养箱中10分钟

使用加热针（在65°C下）将1.5mL食用油样品转移到一个空的10mL小瓶中

添加7.5mL（95：5）乙腈：甲酸（v/v）

搅拌10分钟（rpm）

离心5分钟（g）

将4mL上清液转移到干净的空10mL小瓶中

添加4mL己烷

搅拌10分钟（rpm）

离心5分钟（g）

将2.5mL的下层样品转移到一个空的，圆底的4mL样品瓶中

将提取物在45°C蒸发至干

添加μL（1：1）甲醇：水重构。

将重构的提取物注入LC（或可选地通过0.2μm过滤器进行注入）。

自动化分析结果

为了验证自动化结果的准确性，我们使用四种黄曲霉毒素标样B1、B2、G1、G2来验证。以下是四种目标化合物的质谱分析的采集参数。

自动化方法的线性非常好，黄曲霉毒素的校正曲线的R2大于0.，下图为B1的标准曲线。

下图为添加了10ng/mL(AflatoxinsB1,G1)和2.5ng/mL(AflatoxinsB2,G2)的亚麻籽油的色谱图，峰形好并且信噪比理想。

在四种食用油的样品中，四种黄曲霉毒素的平均加标回收率为89.7%、%、91.5%和%。

自动化的可重复性高，4次重复检测的结果RSD%（%CV）小于6.90%。

哲斯泰的解决方案总结：

高效准确的自动提取食用油中的霉菌毒素结合LC-MS/MS分析

可重复性高，平均RSD为4.32%

四种黄曲霉毒素的平均回收率为%

线性高，R2大于0.

黄曲霉毒素的最高允许含量：

联合国世界卫生组织（WHO）和粮农组织（FAO）年规定食品中AflatoxinB1的最高允许含量为15μg/kg。欧洲法规的最高允许含量：AflatoxinB1:8.0μg/kg(花生),0.1μg/kg(婴儿食品);AflatoxinsB1,B2,G1andG2总量:15μg/kg(花生),4.0μg/kg(粮食)

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快速振荡演示：

自动化液液萃取演示：

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